Visão Geral

O teste FISH de fusão ROS1 identifica o rearranjo do gene ROS1 que define um subconjunto pequeno, mas importante, de pacientes com câncer de pulmão de células não pequenas elegíveis para terapia direcionada a ROS1. Para distribuidores que atendem laboratórios de diagnóstico molecular, o valor do teste é a seleção precisa do paciente: apenas alguns por cento dos tumores pulmonares carregam a fusão, portanto, a triagem precisa evita o tratamento da população errada. Este artigo aborda quem deve ser testado e como o FISH confirma a fusão.

Como Funciona

A hibridização in situ por fluorescência usa sondas de DNA marcadas que se ligam ao locus ROS1 no cromossomo 6. Quando um rearranjo está presente, o padrão de sinal mostra uma separação ou colocalização distinta do par normal, lido por um citogeneticista treinado sob um microscópio de fluorescência. O método visualiza diretamente o evento genômico, que permanece a abordagem de confirmação estabelecida, mesmo com a expansão dos menus de fusão das plataformas de sequenciamento.

Indicações

O teste é recomendado para câncer de pulmão de células não pequenas avançado, particularmente adenocarcinoma, onde um agente direcionado a ROS1 é planejado. É mais informativo quando iniciado precocemente para que a minoria elegível não seja perdida. Os compradores devem posicionar o ensaio ao lado de um perfil mais amplo, em vez de como um substituto, porque muitos pacientes precisam de vários resultados de marcadores antes que um regime seja fixado.

Dosagem e Administração

O ensaio é executado em uma seção de tecido fixo; os laboratórios devem especificar a fixação, a espessura da seção e a área mínima do tumor necessária para uma leitura confiável. O tempo de resposta geralmente é de vários dias úteis. Os relatórios devem indicar a porcentagem de células positivas e o padrão de sinal, pois pagadores e prescritores esperam esses detalhes para aprovação e para a seleção do agente alvo apropriado.

Armazenamento e Fornecimento

Kits de sondas e reagentes são sensíveis à luz e à temperatura e devem ser enviados e armazenados sob condições validadas de 2 a 8°C com registro. Obtenha de fornecedores que ofereçam dados de validação de sondas, lâminas de controle positivo e treinamento. Confirme se as quantidades mínimas de pedido atendem ao volume mensal de testes do laboratório e se as sondas são licenciadas para o uso diagnóstico pretendido no mercado de destino.

As equipes de aquisição devem confirmar se o fornecedor envia lâminas de controle positivo e negativo com cada lote, para que o laboratório possa verificar o desempenho do leitor antes que qualquer amostra de paciente seja interpretada e relatada ao prescritor.

Os laboratórios devem registrar a identidade do leitor e a configuração do microscópio usada para cada lote, para que os resultados do FISH permaneçam reproduzíveis entre turnos e locais.

Perguntas Frequentes

P: Quais pacientes com câncer de pulmão devem receber FISH ROS1 primeiro? P: Um resultado FISH positivo garante a resposta à terapia ROS1? P: Quantas células positivas confirmam uma fusão verdadeira? P: O sequenciamento pode substituir o FISH para detecção de ROS1?