Resumo

A detecção de expressão de PD-L1 com o clone SP263 usa imunohistoquímica para visualizar a proteína PD-L1 em seções tumorais fixadas em formalina e embutidas em parafina.O anticorpo SP263 é um reagente monoclonal de coelho desenvolvido para a plataforma de coloração automatizada VENTANA, e serve como um diagnóstico complementar que ajuda a determinar a elegibilidade para vários inibidores do ponto de verificação imunológico.Compreender o princípio do ensaio esclarece por que os resultados são relatados como uma proporção de células manchadas em vez de uma simples chamada positiva ou negativa.

O Princípio da Coloração

O método começa por aplicar o anticorpo anti- PD- L1 a um slide de tecido fino, onde se liga à proteína PD- L1 expressa na membrana celular.Um sistema de detecção secundária então deposita um cromogênio que torna os locais ligados como uma mancha marrom visível sob o microscópioComo o PD-L1 se encontra na superfície celular, a pontuação concentra-se na coloração membranosa e a intensidade é interpretada em relação a limiares validados, em vez de ser estimada apenas a olho nu.

Leitura do índice de proporção do tumor

Os patologistas avaliam a porcentagem de células tumorais viáveis que apresentam coloração parcial ou completa da membrana, uma abordagem conhecida como pontuação da proporção do tumor.Diferentes alegações de diagnóstico complementares utilizam limites diferentes: por exemplo, o atezolizumabe no cancro do pulmão não de células pequenas está associado a um limiar de pelo menos 1% de coloração de células tumorais,enquanto o cemiplimab em certas indicações utiliza um limiar de células tumorais mais elevadoO mesmo ensaio SP263 pode, portanto, apoiar várias decisões de imunoterapia, dependendo da regra de pontuação validada aplicada.

Por que a escolha dos clones é importante

Os ensaios de PD-L1 não são intercambiáveis, porque cada clone de anticorpo reconhece um epitopo ligeiramente diferente e cada plataforma tem sua própria química de coloração.Os laboratórios devem relatar o clone exato e o algoritmo de pontuação utilizado para que o clínico possa comparar o resultado com o rótulo correto do medicamentoUm fluxo de trabalho claramente documentado e padronizado protege o significado clínico da pontuação em todos os locais.

Fatores pré-analíticos que afetam o resultado

A qualidade da amostra influencia fortemente a pontuação de PD-L1. A fixação que é muito longa ou muito curta pode alterar a retenção de antígeno da membrana, e o baixo conteúdo do tumor deixa poucas células para pontuar de forma confiável.Os laboratórios devem definir os tempos de fixação aceitáveis e a área mínima do tumor antes da coloraçãoUm resultado comunicado com o seu contexto pré-analítico é muito mais confiável do que um número emitido sem advertências.

Perguntas frequentes

P:O que é que o SP263 realmente mede?A:Ele mede a proteína PD- L1 nas membranas celulares numa secção de tecido por imunohistoquímica cromogénica, expressa como proporção de células tumorais tingidas.

P:Todos os testes de PD-L1 são intercambiáveis?A:Não, diferentes clones e plataformas de anticorpos são validados separadamente, pelo que a regra de clonagem e pontuação comunicada deve corresponder à terapia pretendida.

P:Porque é que o resultado é uma percentagem em vez de um sim ou não?A:As reivindicações diagnósticas de acompanhamento estão ligadas aos limiares de proporção, de modo que a pontuação deve refletir quantas células tumorais expressam o marcador.